原发性肝癌是一种具有极高发病率和死亡率的恶性肿瘤。《2018全球癌症报告》报告显示，2018年全球肝癌新发84.1万例，死亡78.2万例（8.2%），其发病率在所有癌症中排名第五，致死率第二。我国作为肝癌高发国家，2015年全国数据显示，全国新发46.6万例，死亡42.2万例。目前肝癌发病率及长期生存率仍未得到良好控制。据2020年报告显示，肝癌发病率仍保持每年2%至3%的增长速度，五年生存率仅为18%。因此，确定肝癌发生发展机制并探索新的整体治疗方法具有重要意义。蛋白质翻译后修饰(PTMS)是蛋白质加工和成熟过程中的重要步骤，参与改变蛋白质的空间构象、活性、稳定性及定位等，对细胞生命活动的调控具有十分重要的作用。现阶段已知的PTMS多达数百种，主要包括甲基化、乙酰化、糖基化、磷酸化、泛素化、琥珀酰化等。其中赖氨酸琥珀酰化修饰是近3年来新发现的蛋白翻译后修饰，在细胞内广泛存在，可参与调控包括三羧酸循环、氨基酸代谢以及脂肪酸代谢的多个代谢过程。天阳丸由巴戟天20g，肉蓉15g，锁阳15g，熟地黄15g，山英肉15g，山药15g配伍组成。申请人主持的国自然青年基金及中国博士后项目围绕天阳丸对糖代谢紊乱的调控作用已取得一定进展，并在进一步实验探索中发现，天阳丸可显著抑制高糖培养下HepG2肝癌细胞葡萄糖利用率、抑制肝癌细胞增殖。CCK-8测试结果表明，经过24、48h和72h的观察，天阳丸对HepG2肝癌细胞的生长速度具有明显减缓作用，且随着浓度的升高对HepG2肝癌细胞增殖的抑制效果也随之升高。Transwell迁移实验结果表明，随着天阳丸浓度的增加，细胞的数量也呈现出明显的负相关性。48h的培养过程中，天阳丸低剂量组的迁移性能明显低于空白对照组。流式细胞仪检测结果表明，天阳丸能够促进HepG2肝癌细胞的凋亡，天阳丸干预的HepG2细胞在48h时凋亡率显著升高。在此基础上，通过4D定量蛋白质组学及琥珀酰化修饰组学联合分析，天阳丸可下调肝癌细胞糖酵解过程中多种酶（Aldoa，GPI，PGK1，TPI1，LDH，ADH，PKM，ENO3，Pgam1）的琥珀酰化修饰水平，进而抑制肝癌细胞糖酵解整体通量。最后通过葡萄糖、乳酸、ATP实验结果表明，天阳丸可靶向Hippo信号通路调控HepG2肝癌细胞的糖代谢水平。初步阐明了天阳丸抑制肝癌细胞增殖的分子机制，研究成果有望以蛋白质酰化修饰这前沿领域为切入点，揭示中药复方天阳丸改善肝癌细胞糖代谢重编程的分子机制，为中医药在临床防治肿瘤方面提供坚实的实验依据及研究方向。